3/1:50110

5.1.10. ПРИМЕНЕНИЕ ИСПЫТАНИЯ НА БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ЭНДОТОКСИНЫ

Настоящая общая фармакопейная статья приводится для информации.

ВВЕДЕНИЕ

Эндотоксины грамотрицательных бактерий являются самой распространенной причиной

токсических реакций, возникающих в результате загрязнения фармацевтической продукции

пирогенами; их общая пирогенная активность намного выше, чем у других известных

пирогенных веществ. Бактериальные эндотоксины представляют собой липополисахариды,

которые являются термостабильным компонентом наружной части клеточной стенки всех

грамотрицательных микроорганизмов. Существует лишь небольшое количество пирогенов,

обладающих иной структурой. В целом, по отсутствию бактериальных эндотоксинов в

субстанции для фармацевтического применения и (или) лекарственном препарате можно

сделать вывод об отсутствии пирогенных веществ при условии, что наличие пирогенов

неэндотоксиновой природы исключено. Испытание на активацию моноцитов (2.6.30.)

является подходящим методом для определения отсутствия пирогенов неэндотоксиновой

природы в субстанции для фармацевтического применения и лекарственном препарате.

Присутствие бактериальных эндотоксинов может быть замаскировано факторами,

влияющими на реакцию между эндотоксинами и лизатом амѐбоцитов мечехвоста. На

обнаружение эндотоксинов могут влиять условия и (или) время хранения образцов и

реактивов. Следовательно, перед проведением испытания на бактериальные эндотоксины

или перед выбором между испытаниями на бактериальные эндотоксины и на пирогенность

или на активацию моноцитов, необходимо подтвердить возможность его проведения для

конкретной субстанции для фармацевтического применения и (или) лекарственного

препарата; при этом может быть необходимо выполнение процедуры устранения

мешающих факторов.

Согласно указаниям общей монографии 2.6.14. Бактериальные эндотоксины, при

проведении испытания должны быть выполнены следующие условия:

 подтвержденное отсутствие влияния материалов, используемых в испытании. Должно

быть показано отсутствие эндотоксинов в воде для испытания на бактериальные

эндотоксины, других реактивах и расходных материалах. Также, должна быть

подтверждена чувствительность лизата амѐбоцитов, заявленная производителем;

 чувствительность лизата амѐбоцитов определенная как в присутствии, так и в отсутствии

испытуемого образца, в связи с возможным влиянием на испытание. Между двумя

полученными значениями чувствительности не должно быть значимой разницы.

В монографии 2.6.14. Бактериальные эндотоксины представлены методы удаления

мешающих факторов; в случае использования других методов должно быть проведено

дополнительное испытание для подтверждения нейтрализации или удаления мешающих

факторов.

В данной монографии приведены причины установления требований к испытаниям на

бактериальные эндотоксины, а также разъяснения по расчетам и интерпретации

результатов.

Замена испытания Пирогенность, указанного в частной монографии, на испытание

Бактериальные эндотоксины или другие методы, например, испытание на активацию

моноцитов или испытание с использованием рекомбинантного фактора С, требует

подтверждения возможности проведения метода для конкретной субстанции для

фармацевтического применения и (или) лекарственного препарата и получения

соответствующего результата альтернативным методом, в соответствии с указаниями

раздела 1. Общие сведения (см. также подраздел 13 данной общей монографии).

Метод определения бактериальных эндотоксинов может быть указан в частной

монографии. Если метод не указан, используют любой из методов от A до F общей

монографии 2.6.14. Бактериальные эндотоксины.

МЕТОДЫ И КРИТЕРИИ ПРИЕМЛЕМОСТИ

МЕТОДЫ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Добавление бактериальных эндотоксинов к лизату амѐбоцитов может привести к

помутнению, осаждению или гелеобразованию (гель-тромб). Первоначально, только гель-

тромб метод применяли для оценки качества субстанции для фармацевтического

применения и (или) лекарственного препарата при проведении испытания на бактериальные

эндотоксины. Преимущество метода заключалось в простоте принятия решения о качестве

испытуемого образца по результатам испытания на основании отсутствия или присутствия

плотного геля, видимого невооруженным глазом. Количественные фотометрические

методы C, D, E и F были разработаны позднее: данные методы требуют оснащения

соответствующим оборудованием, но могут быть автоматизированы для рутинных

испытаний большого количества образцов одной и той же субстанции для

фармацевтического применения и (или) лекарственного препарата.

Бактериальные эндотоксины могут адсорбироваться на поверхности пробирок или пипеток

из определенных полимерных материалов или типов стекла. Мешающие факторы могут

появиться вследствие высвобождения веществ из полимерных материалов. Следовательно,

используемые материалы должны быть проверены.

ПРЕДЕЛЬНОЕ СОДЕРЖАНИЕ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ЭНДОТОКСИНОВ

Решение использовать в испытании на бактериальные эндотоксины методы качественного

анализа подразумевает, во-первых, установление предельного содержания эндотоксинов

для субстанции для фармацевтического применения и (или) лекарственного препарата,

подлежащих исследованию, и, во-вторых, проведение испытания с целью получения

информации будет ли концентрация эндотоксинов в испытуемом образце ниже или выше

установленного предельного содержания эндотоксинов. Количественные фотометрические

методы C, D, E и F позволяют определить содержание бактериальных эндотоксинов в

испытуемом образце, но для соответствия фармакопейным требованиям и при рутинном

контроле качества основной вопрос заключается в том, превышает ли это значение

допустимое предельное содержание эндотоксинов.

При установлении предельного содержания бактериальных эндотоксинов в лекарственном

препарате следует учитывать его терапевтическую дозу и пути введения. При установлении

предельного содержания эндотоксинов в субстанции для фармацевтического применения

следует использовать рекомендации по применению и дозированию лекарственного

препарата, в состав которого она входит.

Предельное содержание бактериальных эндотоксинов определяет допустимую

концентрацию эндотоксинов в лекарственном препарате. Если содержание эндотоксинов не

превышает этого показателя, то даже при введении пациенту максимальной дозы

лекарственного препарата в течение часа предполагаемым путем не возникает токсической

реакции, обусловленной эндотоксинами.

Методы качественного анализа в испытаниях на бактериальные эндотоксины не позволяют

установить различия между содержанием эндотоксинов равным предельному содержанию

или выше его. Образование плотного геля происходит, если содержание эндотоксинов в

испытуемом образце достигает значения предельного содержания эндотоксинов и когда

превышает его. В обоих случаях испытуемый образец не выдерживает испытание. Только

при отсутствии образования плотного геля можно сделать вывод, что содержание

эндотоксинов ниже предельного содержания эндотоксинов.

Для испытуемых образцов в твердом состоянии предельное содержание эндотоксинов на

единицу массы или международную единицу (МЕ) активности лекарственного средства

должно быть преобразовано в содержание бактериальных эндотоксинов на миллилитр

испытуемого раствора, поскольку данное испытание может быть проведено только в

растворе. Лекарственные препараты в жидком состоянии (например, растворы для инфузий)

обсуждаются ниже.

ВЫЧИСЛЕНИЕ ПРЕДЕЛЬНОГО СОДЕРЖАНИЯ ЭНДОТОКСИНОВ

Для лекарственных препаратов, вводимых парентерально, предельное содержание

эндотоксинов, определенное на основе дозы, рассчитывают по формуле:

 







где:

–

предельная пирогенная доза бактериальных эндотоксинов на килограмм

массы тела;

–

максимальная разовая доза лекарственного препарата на килограмм массы

тела.

В случае введения лекарственного препарата через частые интервалы или инфузионно, в

качестве М используют общую максимальную дозу, вводимую в течение 1 ч.

Предельное содержание эндотоксинов зависит от лекарственного препарата, пути его

введения и может быть указано в частной монографии. Значения предельной пирогенной

дозы бактериальных эндотоксинов (К) приведены в таблице 5.1.10.−1.

Для других путей введения критерии приемлемости для содержания бактериальных

эндотоксинов определяются, как правило, на основании результатов, полученных в

процессе разработки лекарственного препарата.

Таблица 5.1.10.−1. – Значения предельной пирогенной дозы бактериальных эндотоксинов

Путь введения

Внутривенный

5.0 ME/кг (международных единиц эндотоксина

на килограмм массы тела)

Внутривенный, для

радиофармацевтических лекарственных

препаратов

2.5 ME/кг (международных единиц эндотоксина

на килограмм массы тела)

Интратекальный

0.2 ME/кг (международных единиц эндотоксина

на килограмм массы тела)

Парентеральный, для лекарственных

препаратов вводимых в дозе,

рассчитываемой на квадратный метр

поверхности тела

100 ME/м

(международных единиц

эндотоксина на квадратный метр поверхности

тела)

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ УСТАНОВЛЕНИЯ ПРЕДЕЛЬНОГО СОДЕРЖАНИЯ

ЭНДОТОКСИНОВ В КОНКРЕТНОЙ СУБСТАНЦИИ ДЛЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО

ПРИМЕНЕНИЯ ИЛИ ЛЕКАРСТВЕННОМ ПРЕПАРАТЕ

Допустимое предельное содержание эндотоксинов в субстанции для фармацевтического

применения или лекарственном препарате устанавливают с учетом следующих аспектов.

Расчет предельного содержания эндотоксинов. Предельное содержание эндотоксинов

рассчитывают, как описано в разделе 2.3 данной общей монографии. Показатель определяет

границу безопасности, которую нельзя превышать, если лекарственное средство

предназначено для медицинского применения.

Значение предельного содержания эндотоксинов, указанное в частной монографии.

Обычно отражает достижимое в контролируемом производственном процессе содержание

эндотоксинов в субстанции для фармацевтического применения или лекарственном

препарате. Следовательно, значения предельного содержание эндотоксинов, указанное в

частной монографии, может быть меньше рассчитанного предельного содержания

эндотоксинов. Производитель может установить более жесткие требования к предельному

содержанию эндотоксинов, чем указанные в частной монографии.

Возможности производственного процесса. Производственный процесс может

обеспечивать снижение концентрации или удаление бактериальных эндотоксинов и

соответственно приводить к более низким значениям предельного содержания

эндотоксинов.

Дополнительные требования безопасности. Меры предосторожности принимают с

учетом популяции пациентов (например, использование в педиатрии, для пациентов с

истощением или кахексией и т.д.), конкретных региональных требований (например,

использование при расчетах предельного содержания эндотоксинов более низкой средней

массы тела, 60 кг вместо 70 кг) или любые дополнительные меры безопасности,

запрошенные уполномоченным органом.

Состав. При установлении значения предельного содержания эндотоксинов необходимо

учитывать любую теоретическую эндотоксиновую нагрузку, вносимую любыми

компонентами, используемыми для растворения и (или) разведения (например, вода для

инъекций) субстанции для фармацевтического применения или лекарственного препарата,

или получаемую от исходных материалов и (или) иcходного сырья.

МАКСИМАЛЬНО ДОПУСТИМОЕ РАЗВЕДЕНИЕ

В данном разделе рассматривают вопросы: какое разведение субстанции для

фармацевтического применения или лекарственного препарата следует использовать в

испытании для получения подтверждения, что при отрицательном результате содержание

эндотоксинов в испытуемом образце меньше предельного содержания эндотоксинов, а при

положительном результате  равно или превышает допустимое предельное содержание.

Максимально допустимое разведение представляет собой наибольшее разведение испытуе-

мого образца, при котором может быть определено предельно допустимое содержание эн-

дотоксинов. Оно зависит от предельного содержания эндотоксинов и чувствительности ли-

зата амѐбоцитов (предела обнаружения). Максимально допустимое разведение рассчи-

тывают по формуле:

  



где:

–

чувствительность лизата амѐбоцитов в международных единицах в

миллилитре.

Концентрацию испытуемого раствора выражают в единицах:

– мг/мл, если предельное содержание эндотоксинов указано в массовых

единицах (МЕ/мг);

– ЕД/мл, если предельное содержание эндотоксинов указано в пересчете на

единицу биологической активности (МЕ/ЕД);

– мл/мл, если предельное содержание эндотоксинов указано в объемных

единицах (МЕ/мл).

Предел обнаружения () представляет собой чувствительность лизата в гель-тромб методе

(МЕ/мл), заявленную производителем лизата амѐбоцитов, или самая низкая концентрация

эндотоксинов, определенная по стандартной калибровочной кривой в турбидиметрическом

или хромогенном фотометрических методах. Если значение максимально допустимого

разведения не является целым числом, для рутинных испытаний можно использовать

подходящее целое число, меньшее, чем максимально допустимое разведение

(приготовление раствора испытуемого образца в меньшем разведении, чем максимально

допустимое разведение). В таком случае, отрицательный результат означает, что

содержание бактериальных эндотоксинов ниже допустимого предельного содержания. Если

содержание бактериальных эндотоксинов в испытуемом образце ниже допустимого

предельного содержания эндотоксинов, но достаточно велико, чтобы вызвать

гелеобразование лизатом амѐбоцитов, то испытание в таких условиях может быть

положительным. Следовательно, когда в испытании с использованием «рабочего»

разведения, кратность которого меньше максимально допустимое разведение, получен

положительный результат, испытуемый образец разводят до максимально допустимого

разведения и повторяют испытание. В любом сомнительном или спорном случае

необходимо использовать максимально допустимое разведение. Это подчеркивает важность

подтверждения чувствительности лизата амѐбоцитов.

Пример

Необходимо провести испытание раствора 50 мг/мл натрия фенитоина (для внутривенного

введения). Определяют МДР, используя следующие данные:

М  максимальная доза для человека  15 мг на килограмм массы тела;

С  концентрация испытуемого раствора  50 мг/мл;

К  предельная пирогенная доза эндотоксинов  5 МЕ/кг;



 предел обнаружения  0.4 МЕ/мл.

МДР =











= 41.67

Для рутинных испытаний данного лекарственного препарата 1 мл испытуемого раствора

разводят до 20 мл (MДР/2 округляют до ближайшего меньшего целого числа). В случае,

если результат испытания будет положительным, то 1 мл испытуемого раствора следует

развести до 41.67 мл и повторить испытание. Разведение до 41.67 мл также необходимо,

когда испытание проводят в спорных случаях.

ОЦЕНКА РИСКОВ

Отсутствие бактериальных эндотоксинов в субстанции для фармацевтического применения

и (или) лекарственном препарате, как указано в разделе 1 данной общей монографии,

позволяет сделать вывод об отсутствии пирогенов при условии исключения присутствия

пирогенов неэндотоксиновой природы.

Для подтверждения отсутствия неэндотоксиновых пирогенов в субстанциях для

фармацевтического применения и (или) лекарственных препаратах рекомендуется

использовать испытание на активацию моноцитов (2.6.30) при выпуске или в ходе

разработки производственного процесса. Если в производственный процесс вносят какие-

либо изменения, способные повлиять на качество субстанции для фармацевтического

применения и (или) лекарственного препарата в отношении пирогенности, испытания

выбранным методом повторяют. Например, к таким изменениям относят использование

другого исходного сырья, другой производственной площадки и других параметров

процесса.

Решение об использовании испытания на бактериальные эндотоксины в качестве

единственного испытания на пирогенность необходимо принимать после тщательной

оценки рисков для субстанции для фармацевтического применения и (или) лекарственного

препарата, содержащих пирогены неэндотоксиновой природы. Оценку рисков проводят с

учетом любого фактора, способного привести к включению пирогенов, необнаруживаемых

при испытании на бактериальные эндотоксины. Далее представлен перечень факторов,

которые необходимо учитывать при оценке рисков. Список не является исчерпывающим,

при необходимости может быть дополнен.

Производство (химический синтез, ферментация, биотехнологический метод). Для

продуктов ферментации учитывают экспрессионную систему: прокариотическая или

эукариотическая и, в случае использования прокариотической системы, ‒

грамположительные или грамотрицательные бактерии. Кроме того, рассматривают

компоненты питательных сред с учетом их происхождения (синтетические, животного или

растительного происхождения).

Бионагрузка. Должно быть учтено потенциальное присутствие дрожжевых грибов и

грамположительных бактерий в качестве контаминантов активной фармацевтической

субстанции, вспомогательных веществ или исходных материалов и исходного сырья,

используемых при производстве лекарственного препарата, а также происхождение сырья

(синтетическое, животного или растительного происхождения). Качество воды также играет

важную роль в общей оценке риска.

Возможности последующей стадии производственного процесса. Необходимо

подтвердить, удаляются ли бактериальные эндотоксины на последующих стадиях

производственного процесса.

Безопасность. При оценке риска необходимо учитывать целевую популяцию и путь

введения (например, внутривенно, интратекально и др.).

Стабильность обнаружения эндотоксинов. Следует учитывать, что на возможность

обнаружения эндотоксинов оказывают влияние взаимодействие с определенными

компонентами, условия или время хранения, температура, пробоподготовка испытуемого

образца. Должны быть установлены процедуры хранения, пробоподготовки и смешивания

образцов, подтверждающие отсутствие влияния на стабильность обнаружения

бактериальных эндотоксинов.

СТАНДАРТЫ ЭНДОТОКСИНА

Стандарт эндотоксина СО ГФ РК (EP BRP) предназначен для использования в качестве

стандартного образца. Стандартный образец должен соответствовать Международному

стандартному образцу эндотоксина, устанавливаемую Всемирной организацией

здравоохранения и выражен в международных единицах эндотоксина на флакон / ампулу.

За международную единицу эндотоксина принимают активность определенного количества

Международного стандартного образца эндотоксина. Для обычных целей может быть

использован другой стандартный образец при условии, что он соответствует

Международному стандартному образцу эндотоксина или фармакопейному стандарту и

выражен в международных единицах эндотоксина.

ПРИМЕЧАНИЕ: Одна международная единица (МЕ) эндотоксина соответствует одной

единице эндотоксина (ЕЭ).

ВОДА ДЛЯ ИСПЫТАНИЯ НА БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ЭНДОТОКСИНЫ

Вода для испытания на бактериальные эндотоксины представляет собой стерильную воду,

не содержащую эндотоксинов в количествах, определяемых в испытании. Обычно она

коммерчески доступна и сертифицирована.

В разделе 2.6.14. Бактериальные эндотоксины указано, что для подготовки воды для

испытания на бактериальные эндотоксины помимо тройной дистилляции могут быть

использованы и другие методы. Приемлемые результаты дает метод обратного осмоса, в

некоторых случаях предпочтительнее проведение процесса дистилляции более трех раз.

Независимо от используемого метода, полученная вода не должна содержать поддающиеся

обнаружению бактериальные эндотоксины.

РН СМЕСИ

В испытании на бактериальные эндотоксины оптимальное образование плотного гель-

тромба происходит при значениях рН от 6.0 до 8.0. Однако, добавление лизата амѐбоцитов в

испытуемый образец может привести к снижению значения рН.

ПОДТВЕРЖДЕНИЕ ЗАЯВЛЕННОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ЛИЗАТА АМЁБОЦИТОВ

При приготовлении растворов лизата амѐбоцитов важно следовать инструкциям

производителя. Концентрации эндотоксинов в конечной точке реакции для каждого из

разведений в гель-тромб методах А и В преобразуют в логарифмы. Необходимость

преобразования заключается в том, что построенный график частотного распределения

логарифмических значений, обычно гораздо ближе к кривой нормального распределения,

чем частотное распределение самих коэффициентов разведения; фактически они настолько

близки, что допустимо использовать нормальное распределение в качестве математической

модели и вычисление доверительного интервала с помощью t-критерия Стьюдента.

ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЕ ИСПЫТАНИЕ НА МЕШАЮЩИЕ ФАКТОРЫ

Испытания на присутствие бактериальных эндотоксинов не могут быть проведены без

дополнительной подготовки, если:

 испытуемый образец не смешивается с реактивами;

 рН раствора испытуемого образца нельзя довести до значения от 6.0 до 8.0;

 испытуемый образец ингибирует или активирует ферментативную реакцию (например,

испытуемый образец содержит β-D-глюканы).

Необходимо проводить предварительное испытание на наличие мешающих факторов. В

случае обнаружения мешающих факторов необходимо доказать эффективность процедуры

их удаления и отсутствие влияния процедуры на любые присутствующие бактериальные

эндотоксины.

Целью предварительного испытания является проверка нулевой гипотезы, что

чувствительность лизата амѐбоцитов в присутствии испытуемого образца не отличается от

чувствительности лизата амѐбоцитов в отсутствие испытуемого образца. В методах А и В

нулевую гипотезу принимают, если чувствительность лизата амѐбоцитов в присутствии

испытуемого образца составляет не менее 0.5 и не более, чем в два раза превышает

чувствительность самого лизата.

В испытаниях на присутствие мешающих факторов методами А и В необходимо

использование испытуемого образца, в котором эндотоксины не обнаруживаются. Это

представляет собой теоретическую проблему при испытании новых лекарственных

препаратов. Следовательно, для количественных фотометрических методов C, D, E и F

используют другой подход.

Следует обратить внимание, что для проведения испытания методами D и E, в которых

используют хромогенный пептид, необходимы реактивы, не используемые в методах A, B,

C и F. Следовательно, соответствие методов A, B, C или F требованиям к мешающим

факторам нельзя без экспериментального подтверждения экстраполировать на метод D или

метод E.

УСТРАНЕНИЕ МЕШАЮЩИХ ФАКТОРОВ

Методики устранения мешающих факторов не должны приводить к увеличению или

уменьшению (например, вследствие адсорбции) количества бактериальных эндотоксинов в

испытуемом образце. Корректный способ проверки эффективности нейтрализации

мешающих факторов состоит в применении метода добавок, который представляет собой

добавление к испытуемому образцу известного количества бактериальных эндотоксинов с

последующим измерением их открываемости.

Методы С и D. Если мешающие факторы обусловлены природой субстанции для

фармацевтического применения или лекарственного препарата и не могут быть устранены

общепринятыми методами (например, разведением или центрифугированием), возможно

построение калибровочной кривой с использованием испытуемого образца той же

субстанции для фармацевтического применения или лекарственного препарата, но

очищенного от эндотоксинов путем соответствующей обработки или разведения.

Испытание на бактериальные эндотоксины проводят путем сравнения с указанной

калибровочной кривой.

Установлено, что в большинстве случаев подходит ультрафильтрация с использованием

асимметричных мембранных фильтров из триацетата целлюлозы. Фильтры должны быть

надлежащим образом проверены, поскольку при некоторых обстоятельствах производные

целлюлозы (β-D-глюканы) могут быть причиной ложноположительных результатов.

Другим вариантом удаления мешающих факторов является двухэтапная процедура, при

которой, на первом этапе бактериальные эндотоксины в испытуемом образце с мешающими

факторами фиксируют на твердой фазе (например, метод предварительного

концентрирования с использованием твердофазной экстракции), а на втором – после

удаления мешающих факторов (например, путем промывки) бактериальные эндотоксины

обнаруживают в неизменном виде в подходящих условиях испытания.

ЦЕЛЬ ПРОВЕДЕНИЯ КОНТРОЛЬНЫХ ИСПЫТАНИЙ

Цель проведения контрольных испытаний состоит в проверке активности лизата

амебоцитов в условиях испытаний методами A и B. Выполняют контрольное испытание с

раствором стандартного образца эндотоксина в воде для испытания на бактериальные

эндотоксины в концентрации, в два раза превышающем указанную производителем

чувствительность лизата амѐбоцитов. В качестве отрицательного контроля используют воду

для испытания на бактериальные эндотоксины для подтверждения отсутствия

бактериальных эндотоксинов в обнаруживаемой концентрации.

Положительный контроль, содержащий испытуемый образец в концентрации, применяемой

в испытании, предназначен для подтверждения отсутствия мешающих факторов.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

Незначительные количества бактериальных эндотоксинов, содержащиеся в воде или в

любом другом реактиве или материале, с которым во время испытания контактирует лизат

амѐбоцитов, могут не обнаруживаться до тех пор, пока это количество не достигнет предела

обнаружения лизата амѐбоцитов. Даже незначительные количества эндотоксинов могут

увеличить их содержание в растворе с испытуемым образцом до значения, несколько

превышающего предел обнаружения лизата амѐбоцитов, и вызвать положительную

реакцию.

Риск возникновения такого нежелательного явления можно уменьшить путем проверки

воды для испытания на бактериальные эндотоксины, других реактивов и материалов с

использованием наиболее чувствительного лизата амѐбоцитов или, по крайней мере, более

чувствительного, чем лизат амѐбоцитов, применяемый при испытании лекарственного

средства. Даже в этом случае риск такого ложноположительного результата не может быть

полностью исключен.

ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДОВ, ПРЕДСТАВЛЕННЫХ В ГОСУДАРСТВЕННОЙ

ФАРМАКОПЕЕ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН

Методы испытаний, приведенные в общих монографиях и частных монографиях,

валидированы в соответствии с принятой научной практикой и действующими

рекомендациями по валидации аналитических методик и являются официальными (см.

раздел 1. Общие сведения). Следовательно, методы, представленные в общих монографиях

2.6.14. Бактериальные эндотоксины, 2.6.30. Испытание на активацию моноцитов и 2.6.32.

Испытание на бактериальные эндотоксины с использованием рекомбинантного фактора

С не нуждаются в повторной валидации (ревалидации), однако требуют подтверждения

возможности их использования для конкретной субстанции для фармацевтического

применения и (или) лекарственного препарата в конкретных условиях испытания.

Процедура, а также материалы и реактивы, используемые в методике, должны быть

проверены согласно указаниям для соответствующего испытания. Отсутствие мешающих

факторов (при необходимости, процедуры их устранения) проверяют на образцах не менее,

чем трех производственных серий.

Испытание на активацию моноцитов, согласно указаниям общей монографии 2.6.30.

Испытание на активацию моноцитов, в первую очередь, предназначено для замены

испытания на пирогенность. В этой же общей монографии представлены рекомендации по

выбору и использованию методов (А, В и С) и валидации испытания.

ЗАМЕНА МЕТОДА, ПРЕДСТАВЛЕННОГО В ЧАСТНОЙ МОНОГРАФИИ

ЗАМЕНА МЕТОДОМ, ПРЕДСТАВЛЕННЫМ В ГОСУДАРСТВЕННОЙ ФАРМАКОПЕЕ

РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН

Замена метода, предписанного в частной монографии, на другой метод, представленный в

ГФ РК, необходимо рассматривать как использование альтернативного метода взамен

фармакопейного (см. раздел 1. Общие сведения).

Альтернативный метод, представленный в фармакопее не нуждается в повторной

валидации, однако необходимо подтверждение возможности его использования для

конкретной субстанции для фармацевтического применения или лекарственного препарата

в конкретных условиях испытания, а также для подтверждения эквивалентности

предписанному методу.

ЗАМЕНА МЕТОДОМ, НЕ ПРЕДСТАВЛЕННЫМ В ГОСУДАРСТВЕННОЙ ФАРМАКОПЕЕ

РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН

Замена метода, предписанного в частной монографии, методом, не представленным в

Государственной фармакопее Республики Казахстан, необходимо рассматривать как

использование альтернативного метода взамен фармакопейного (см. раздел 1. Общие

сведения).